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產品展示

Focurose CL-4B

價 格:詢價

規(guī) 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產 地:中國

貨 號:HN030302001L

品 牌:匯研生物


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產品概述

    為確保產品的性能和無憂的操作,使用前請仔細閱讀本手冊,有任何疑問請咨詢本公司售后技術支持或當?shù)氐匿N售人員(聯(lián)系方式見附錄)。

 

1.產品介紹

Focurose CL-4B適用于生物大分子物質的組分分離和中度純化(去除小分子雜質),例如:病毒顆粒、巨大分子蛋白、重組乙型肝炎表面抗原、多糖及大分子復合物。

特點:

a.高(理化)穩(wěn)定性、高回收率(可高達95%)。

b.溫和的洗脫條件可以完整的保留生物大分子生物學活性和功能。

c.易于維護。

 

表1:性能參數(shù)

介質

交聯(lián)4%的瓊脂糖

粒徑范圍

45-165μm

平均粒徑

≈90μm

分離范圍(球蛋白)

60-20000kDa

pH穩(wěn)定性

3-12(長期) 2-14(短期)

化學穩(wěn)定性

0.5M氫氧化鈉、6M鹽酸胍、8M尿素

最大流速

25cm/h

最大壓力

0.03MPa

高溫高壓

  水中121℃X20min

貯存溶液

20%乙醇

貯存溫度

4-30℃

 

2.溶液制備

洗脫液:根據(jù)客戶需求進行配制。

備注:建議在目標溶液中加入一定濃度的鹽(至少0.025 M)用來抑制樣本和介質的離子作用。

 

3.樣品制備

3.1樣品過濾(平均粒徑<45μm,用0.22μm過濾;45μm<平均粒徑<165μm,用0.45μm過濾;平均粒徑>165μm,用   0.8μm過濾)。

 

4.純化流程(以裝填XK 16/70的柱子為例 )

4.1清洗

取140g的沉降介質,加入3倍體積的純化水重懸后用G3砂芯漏斗抽干,重復此步驟兩次。

4.2勻漿

將清洗完的抽干的介質用相同體積(≈140ml)的純化水進行重懸,用玻璃棒緩慢攪拌均勻。

4.3準備柱子

a.將柱管、下柱頭、適配器以及裝柱器用純化水沖洗干凈;

b.安裝下柱頭后擰緊密封圈;

c.注入3-5cm高的純化水;

d.擰下下堵頭,待排出所有氣泡后再擰上下堵頭;

e.安裝裝柱器,將層析柱垂直固定在層析系統(tǒng)附近。

4.4脫氣

   將勻漿后的介質用真空泵或超聲清洗裝置進行脫氣。

4.5裝柱

a. 將脫氣后的介質用玻璃棒或其它攪拌裝置溫和攪拌均勻后,快速、連續(xù)加入(用玻璃棒引流,避免引入氣       泡)到層析柱中。

b. 快速用純化水將裝柱器上端填滿,并裝上裝柱器蓋。

c. 用管路連接層析系統(tǒng)和裝柱器后,擰下下堵頭,以3ml/min(90cm/h)的流速壓柱120min后暫停層析系統(tǒng)。

d. 擰上下堵頭,快速取下裝柱器,用純化水填滿柱管。

e. 將適配器連接層析系統(tǒng),待管路中氣泡排盡后,將適配器稍微傾斜后插入柱管至介質界面上端0.5-1cm,擰緊密封圈。

f. 擰下下堵頭,以4ml/min(120cm/h)的流速壓柱10min后停止層析系統(tǒng)。

g. 標記介質界面刻度,將適配器壓至介質界面以下0.3cm。

4.6柱效檢測

a. 連接層析柱出口至層析系統(tǒng),用純化水以0.66ml/min(20cm/h)的流速平衡2CV(柱體積);

b. 用定量環(huán)或上樣泵注入1%CV的2%丙酮;

c. 以0.66ml/min(20cm/h)的流速運行1.5CV;

d. 計算HETP和As,HETP≤3h(h為平均粒徑)且0.7≤As≤1.3方為合格,否則重裝。

4.7使用

      若柱效檢測合格可立即使用,以1ml/min(30cm/min)的流速用平衡液(平衡液中加入0.15M氯化鈉,抑制可能存在的非特異性吸附)平衡2CV后進行進樣(建議上樣體積≤2.5%CV)分離;若柱效檢測合格后,以1ml/min(30cm/min)的流速用保存液平衡2CV后保存。

 

5.清洗(以裝填XK 16/70的柱子為例 )

5.1 用純化水以0.66ml/min(20cm/h)沖洗2個CV。

5.2  用1.0M NaOH以0.66ml/min(20cm/h)的流速沖洗2個CV。

5.3 用純化水以0.66ml/min(20cm/h)的流速沖洗2個CV。

5.4 用1.0M 乙酸以0.66ml/min(20cm/h)的流速沖洗2個CV。。

5.5 用純化水以0.66ml/min(20cm/h)的流速沖洗2個CV。

5.6 用70%乙醇以0.66ml/min(20cm/h)的流速沖洗2個CV。

5.7 用純化水以0.66ml/min(20cm/h)的流速沖洗2個CV。

5.8 用20%乙醇以0.66ml/min(20cm/h)的流速沖洗2個CV。

 

6.消毒

6.1 用純化水以0.66ml/min(20cm/h)沖洗2個CV。

6.2 用1.0M NaOH以0.66ml/min(20cm/h)的流速反向沖洗2個CV。

6.3 用純化水以0.66ml/min(20cm/h)的流速沖洗2個CV。

6.4 用20%乙醇以0.66ml/min(20cm/h)的流速沖洗2個CV。

 

7.常見問題

表2:常見問題及解決方案

問題

可能原因

解決方法

色譜峰上升過陡

介質裝填過緊

重新裝柱

色譜峰上升過緩或拖尾

介質裝填太松

重新裝柱

柱床有裂縫或干涸

出現(xiàn)泄露或大體積氣泡引入

檢查管路是否有泄露或氣泡,重新裝柱

分離度差

1.選擇的介質不合適

確定選擇的介質是否合適

2.柱效差

測定柱效

3.上樣量過大

優(yōu)化最佳的上樣量

4.流速過快

優(yōu)化最佳的流速

5.分離柱中微生物生長

更換介質

液流較慢

1.蛋白或脂類聚集

及時清洗介質或濾膜

2.蛋白沉淀在介質中

調整平衡液和洗脫液組分,以維持目標物的穩(wěn)定性和介質的結合效率

3.分離柱中微生物生長

所用試劑必須經過過濾和脫氣,樣品上柱前必須離心或過濾

 

8.訂購信息

表3:訂購信息表

產品

規(guī)格

貨號

Focurose CL-4B

25ml

HN030302025M

Focurose CL-4B

100ml

HN030302100M

Focurose CL-4B

500ml

HN030302500M

Focurose CL-4B

1L

HN030302001L

Focurose CL-4B

5L

HN030302005L

Focurose CL-4B

20L

HN030302020L

備注:大規(guī)格包裝產品或其它產品購買,請咨詢本公司當?shù)劁N售或售前技術支持。


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Focurose CL-4B

Focurose CL-4B

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Focurose CL-4B

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