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產(chǎn)品展示

Focurose 6B

價(jià) 格:詢價(jià)

規(guī) 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產(chǎn) 地:中國

貨 號(hào):HN060305001L

品 牌:匯研生物


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產(chǎn)品概述

   為確保產(chǎn)品的性能和無憂的操作,使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本手冊(cè),有任何疑問請(qǐng)咨詢本公司售后技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐匿N售人員(聯(lián)系方式見附錄)。

 

1.產(chǎn)品介紹

Focurose 6B適用于生物大分子物質(zhì)的組分分離和中度純化(去除小分子雜質(zhì)),例如:病毒顆粒、大分子蛋白、超螺旋DNA、多糖及大分子復(fù)合物。

特點(diǎn):

a.高(理化)穩(wěn)定性、高回收率(可高達(dá)95%)。

b.溫和的洗脫條件可以完整的保留生物大分子生物學(xué)活性和功能。

c.易于維護(hù)。

 

表1:性能參數(shù)

介質(zhì)

6%的瓊脂糖

粒徑范圍

45-165μm

平均粒徑

90±5μm

分離范圍(球蛋白)

10-4000kDa

pH穩(wěn)定性

4-9(長(zhǎng)期) 4-9(短期)

化學(xué)穩(wěn)定性

0.5M氫氧化鈉、6M鹽酸胍、8M尿素

最大流速

15cm/h

最大壓力

0.015MPa

貯存溶液

20%乙醇

貯存溫度

4-30℃

 

2.溶液制備

洗脫液:根據(jù)客戶需求進(jìn)行配制。

備注:建議在目標(biāo)溶液中加入一定濃度的鹽(至少0.025 M)用來抑制樣本和介質(zhì)的離子作用。

 

3.樣品制備

3.1樣品過濾(平均粒徑<45μm,用0.22μm過濾;45μm<平均粒徑<165μm,用0.45μm過濾;平均粒徑>165μm,用   0.8μm過濾)。

 

4.純化流程(以裝填XK 16/70的柱子為例 )

4.1清洗

取140g的沉降介質(zhì),加入3倍體積的純化水重懸后用G3砂芯漏斗抽干,重復(fù)此步驟兩次。

4.2勻漿

將清洗完的抽干的介質(zhì)用相同體積(≈140ml)的純化水進(jìn)行重懸,用玻璃棒緩慢攪拌均勻。

4.3準(zhǔn)備柱子

a.將柱管、下柱頭、適配器以及裝柱器用純化水沖洗干凈;

b.安裝下柱頭后擰緊密封圈;

c.注入3-5cm高的純化水;

d.擰下下堵頭,待排出所有氣泡后再擰上下堵頭;

e.安裝裝柱器,將層析柱垂直固定在層析系統(tǒng)附近。

4.4脫氣

   將勻漿后的介質(zhì)用真空泵或超聲清洗裝置進(jìn)行脫氣。

4.5裝柱

a. 將脫氣后的介質(zhì)用玻璃棒或其它攪拌裝置溫和攪拌均勻后,快速、連續(xù)加入(用玻璃棒引流,避免引入氣       泡)到層析柱中。

b. 快速用純化水將裝柱器上端填滿,并裝上裝柱器蓋。

c. 用管路連接層析系統(tǒng)和裝柱器后,擰下下堵頭,以3ml/min(90cm/h)的流速壓柱120min后暫停層析系統(tǒng)。

d. 擰上下堵頭,快速取下裝柱器,用純化水填滿柱管。

e. 將適配器連接層析系統(tǒng),待管路中氣泡排盡后,將適配器稍微傾斜后插入柱管至介質(zhì)界面上端0.5-1cm,擰緊密封圈。

f. 擰下下堵頭,以3ml/min(90cm/h)的流速壓柱10min后停止層析系統(tǒng)。

g. 標(biāo)記介質(zhì)界面刻度,將適配器壓至介質(zhì)界面以下0.3cm。

4.6柱效檢測(cè)

a. 連接層析柱出口至層析系統(tǒng),用純化水以1ml/min(30cm/h)的流速平衡2CV(柱體積);

b. 用定量環(huán)或上樣泵注入1%CV的2%丙酮;

c. 以1ml/min(30cm/h)的流速運(yùn)行1.5CV;

d. 計(jì)算HETP和As,HETP≤3h(h為平均粒徑)且0.7≤As≤1.5方為合格,否則重裝。

4.7使用

      若柱效檢測(cè)合格可立即使用,以0.15ml/min(30cm/min)的流速用平衡液(平衡液中加入0.15M氯化鈉,抑制可能存在的非特異性吸附)平衡2CV后進(jìn)行進(jìn)樣(建議上樣體積≤2.5%CV)分離;若柱效檢測(cè)合格后,以0.15ml/min(30cm/min)的流速用保存液平衡2CV后保存。

 

5.清洗(以裝填XK 16/70的柱子為例 )

5.1 用純化水以0.15ml/min(30cm/h)沖洗2個(gè)CV。

5.2  用1.0M NaOH以0.15ml/min(30cm/h)的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

5.3 用純化水以0.15ml/min(30cm/h)的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

5.4 用1.0M 乙酸以0.15ml/min(30cm/h)的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。。

5.5 用純化水以0.15ml/min(30cm/h)的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

5.6 用70%乙醇以0.15ml/min(30cm/h)的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

5.7 用純化水以0.15ml/min(30cm/h)的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

5.8 用20%乙醇以0.15ml/min(30cm/h)的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

 

6.消毒

6.1 用純化水以0.15ml/min(30cm/h)沖洗2個(gè)CV。

6.2 用1.0M NaOH以0.15ml/min(30cm/h)的流速反向沖洗2個(gè)CV。

6.3 用純化水以0.15ml/min(30cm/h)的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

6.4 用20%乙醇以0.15ml/min(30cm/h)的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

 

7.常見問題

表2:常見問題及解決方案

問題

可能原因

解決方案

回收率低

1.開始收集時(shí)間過晚或停止收集時(shí)間過早

正確及時(shí)的收集目標(biāo)物

2.樣本與介質(zhì)發(fā)生疏水作用

提高上樣流速或降低洗脫流速

3.樣本濃度過低

洗脫后樣本被稀釋,檢測(cè)誤差增大

4.脫鹽后目標(biāo)物質(zhì)溶解度降低或在等電點(diǎn)附近聚集

適當(dāng)提高洗脫液中鹽濃度或調(diào)整合適的pH范圍

5.樣品沒有經(jīng)過前處理

樣品上柱前必須要經(jīng)過離心或過濾

6.介質(zhì)裝填效果不佳

重新裝填

7.分離柱頂部有較大儲(chǔ)樣體積,造成目標(biāo)物洗脫時(shí)間延遲

重新裝填或購買

8.長(zhǎng)期使用后蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集沉淀,造成目標(biāo)物洗脫時(shí)間延遲或殘留

及時(shí)有效地清洗介質(zhì)

9.介質(zhì)中有微生物生長(zhǎng)

介質(zhì)使用完后,請(qǐng)及時(shí)正確保存介質(zhì)

脫鹽效果差

1.停止收集時(shí)間過晚

正確及時(shí)的收集目標(biāo)物

2.上樣體積略大

適當(dāng)?shù)慕档蜕蠘芋w積或上樣濃度

3.樣品沒有經(jīng)過前處理

樣品上柱前必須要經(jīng)過離心或過濾

4.介質(zhì)裝填效果不佳

重新裝填

5.分離柱頂部有較大儲(chǔ)樣體積,造成目標(biāo)物洗脫時(shí)間延遲

重新裝填或購買

6.長(zhǎng)期使用后蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集沉淀,造成目標(biāo)物洗脫時(shí)間延遲

及時(shí)有效地清洗介質(zhì)

7.介質(zhì)中有微生物生長(zhǎng)

介質(zhì)使用完后,請(qǐng)及時(shí)正確保存介質(zhì)

色譜峰上升過陡

介質(zhì)裝填過緊

重新裝柱

色譜峰上升緩慢或拖尾

介質(zhì)裝填太松

重新裝柱

柱床有裂縫或干涸

出現(xiàn)泄露或大體積氣泡引入

檢查管路是否有泄露或氣泡,重新裝柱

液流較慢

1.蛋白或脂類聚集

及時(shí)清洗介質(zhì)或?yàn)V膜

2.蛋白沉淀在介質(zhì)中

調(diào)整平衡液和洗脫液組分,以維持目標(biāo)物的穩(wěn)定性和介質(zhì)的結(jié)合效率

3.分離柱中微生物生長(zhǎng)

所用試劑必須經(jīng)過過濾和脫氣;

樣品上柱前必須離心或過濾

 

8.訂購信息

表3:訂購信息表

產(chǎn)品

規(guī)格

貨號(hào)

Focurose 6B

25ml

HN060305025M

Focurose 6B

100ml

HN060305100M

Focurose 6B

500ml

HN060305500M

Focurose 6B

1L

HN060305001L

Focurose 6B

5L

HN060305005L

Focurose 6B

20L

HN060305020L

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Focurose 6B

Focurose 6B

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Focurose 6B

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