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Focurose 6B

價(jià) 格：詢價(jià)

規(guī) 格：25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產(chǎn) 地：中國

貨號(hào)：HN060305001L

品牌：匯研生物

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產(chǎn)品概述

為確保產(chǎn)品的性能和無憂的操作，使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本手冊(cè)，有任何疑問請(qǐng)咨詢本公司售后技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐匿N售人員（聯(lián)系方式見附錄）。

1.產(chǎn)品介紹

Focurose 6B適用于生物大分子物質(zhì)的組分分離和中度純化（去除小分子雜質(zhì)），例如：病毒顆粒、大分子蛋白、超螺旋DNA、多糖及大分子復(fù)合物。

特點(diǎn)：

a.高（理化）穩(wěn)定性、高回收率（可高達(dá)95%）。

b.溫和的洗脫條件可以完整的保留生物大分子生物學(xué)活性和功能。

c.易于維護(hù)。

表1：性能參數(shù)

介質(zhì)	6%的瓊脂糖
粒徑范圍	45-165μm
平均粒徑	90±5μm
分離范圍(球蛋白)	10-4000kDa
pH穩(wěn)定性	4-9（長(zhǎng)期) 4-9（短期）
化學(xué)穩(wěn)定性	0.5M氫氧化鈉、6M鹽酸胍、8M尿素
最大流速	15cm/h
最大壓力	0.015MPa
貯存溶液	20%乙醇
貯存溫度	4-30℃

2.溶液制備

洗脫液：根據(jù)客戶需求進(jìn)行配制。

備注：建議在目標(biāo)溶液中加入一定濃度的鹽（至少0.025 M）用來抑制樣本和介質(zhì)的離子作用。

3.樣品制備

3.1樣品過濾（平均粒徑<45μm，用0.22μm過濾；45μm<平均粒徑<165μm，用0.45μm過濾；平均粒徑>165μm，用 0.8μm過濾）。

4.純化流程（以裝填XK 16/70的柱子為例）

4.1清洗

取140g的沉降介質(zhì)，加入3倍體積的純化水重懸后用G3砂芯漏斗抽干，重復(fù)此步驟兩次。

4.2勻漿

將清洗完的抽干的介質(zhì)用相同體積(≈140ml)的純化水進(jìn)行重懸，用玻璃棒緩慢攪拌均勻。

4.3準(zhǔn)備柱子

a.將柱管、下柱頭、適配器以及裝柱器用純化水沖洗干凈；

b.安裝下柱頭后擰緊密封圈；

c.注入3-5cm高的純化水；

d.擰下下堵頭，待排出所有氣泡后再擰上下堵頭；

e.安裝裝柱器，將層析柱垂直固定在層析系統(tǒng)附近。

4.4脫氣

將勻漿后的介質(zhì)用真空泵或超聲清洗裝置進(jìn)行脫氣。

4.5裝柱

a. 將脫氣后的介質(zhì)用玻璃棒或其它攪拌裝置溫和攪拌均勻后，快速、連續(xù)加入（用玻璃棒引流，避免引入氣泡）到層析柱中。

b. 快速用純化水將裝柱器上端填滿，并裝上裝柱器蓋。

c. 用管路連接層析系統(tǒng)和裝柱器后，擰下下堵頭，以3ml/min(90cm/h)的流速壓柱120min后暫停層析系統(tǒng)。

d. 擰上下堵頭，快速取下裝柱器，用純化水填滿柱管。

e. 將適配器連接層析系統(tǒng)，待管路中氣泡排盡后，將適配器稍微傾斜后插入柱管至介質(zhì)界面上端0.5-1cm，擰緊密封圈。

f. 擰下下堵頭，以3ml/min(90cm/h)的流速壓柱10min后停止層析系統(tǒng)。

g. 標(biāo)記介質(zhì)界面刻度，將適配器壓至介質(zhì)界面以下0.3cm。

4.6柱效檢測(cè)

a. 連接層析柱出口至層析系統(tǒng)，用純化水以1ml/min(30cm/h)的流速平衡2CV(柱體積)；

b. 用定量環(huán)或上樣泵注入1%CV的2%丙酮；

c. 以1ml/min(30cm/h)的流速運(yùn)行1.5CV；

d. 計(jì)算HETP和As，HETP≤3h（h為平均粒徑）且0.7≤As≤1.5方為合格，否則重裝。

4.7使用

若柱效檢測(cè)合格可立即使用，以0.15ml/min(30cm/min)的流速用平衡液（平衡液中加入0.15M氯化鈉，抑制可能存在的非特異性吸附）平衡2CV后進(jìn)行進(jìn)樣（建議上樣體積≤2.5%CV）分離；若柱效檢測(cè)合格后，以0.15ml/min(30cm/min)的流速用保存液平衡2CV后保存。

5.清洗（以裝填XK 16/70的柱子為例）

5.1 用純化水以0.15ml/min（30cm/h）沖洗2個(gè)CV。

5.2 用1.0M NaOH以0.15ml/min（30cm/h）的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

5.3 用純化水以0.15ml/min（30cm/h）的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

5.4 用1.0M 乙酸以0.15ml/min（30cm/h）的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。。

5.5 用純化水以0.15ml/min（30cm/h）的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

5.6 用70%乙醇以0.15ml/min（30cm/h）的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

5.7 用純化水以0.15ml/min（30cm/h）的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

5.8 用20%乙醇以0.15ml/min（30cm/h）的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

6.消毒

6.1 用純化水以0.15ml/min（30cm/h）沖洗2個(gè)CV。

6.2 用1.0M NaOH以0.15ml/min（30cm/h）的流速反向沖洗2個(gè)CV。

6.3 用純化水以0.15ml/min（30cm/h）的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

6.4 用20%乙醇以0.15ml/min（30cm/h）的流速?zèng)_洗2個(gè)CV。

7.常見問題

表2：常見問題及解決方案

問題	可能原因	解決方案
回收率低	1.開始收集時(shí)間過晚或停止收集時(shí)間過早	正確及時(shí)的收集目標(biāo)物
	2.樣本與介質(zhì)發(fā)生疏水作用	提高上樣流速或降低洗脫流速
	3.樣本濃度過低	洗脫后樣本被稀釋，檢測(cè)誤差增大
	4.脫鹽后目標(biāo)物質(zhì)溶解度降低或在等電點(diǎn)附近聚集	適當(dāng)提高洗脫液中鹽濃度或調(diào)整合適的pH范圍
	5.樣品沒有經(jīng)過前處理	樣品上柱前必須要經(jīng)過離心或過濾
	6.介質(zhì)裝填效果不佳	重新裝填
	7.分離柱頂部有較大儲(chǔ)樣體積，造成目標(biāo)物洗脫時(shí)間延遲	重新裝填或購買
	8.長(zhǎng)期使用后蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集沉淀，造成目標(biāo)物洗脫時(shí)間延遲或殘留	及時(shí)有效地清洗介質(zhì)
	9.介質(zhì)中有微生物生長(zhǎng)	介質(zhì)使用完后，請(qǐng)及時(shí)正確保存介質(zhì)
脫鹽效果差	1.停止收集時(shí)間過晚	正確及時(shí)的收集目標(biāo)物
	2.上樣體積略大	適當(dāng)?shù)慕档蜕蠘芋w積或上樣濃度
	3.樣品沒有經(jīng)過前處理	樣品上柱前必須要經(jīng)過離心或過濾
	4.介質(zhì)裝填效果不佳	重新裝填
	5.分離柱頂部有較大儲(chǔ)樣體積，造成目標(biāo)物洗脫時(shí)間延遲	重新裝填或購買
	6.長(zhǎng)期使用后蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集沉淀，造成目標(biāo)物洗脫時(shí)間延遲	及時(shí)有效地清洗介質(zhì)
	7.介質(zhì)中有微生物生長(zhǎng)	介質(zhì)使用完后，請(qǐng)及時(shí)正確保存介質(zhì)
色譜峰上升過陡	介質(zhì)裝填過緊	重新裝柱
色譜峰上升緩慢或拖尾	介質(zhì)裝填太松	重新裝柱
柱床有裂縫或干涸	出現(xiàn)泄露或大體積氣泡引入	檢查管路是否有泄露或氣泡，重新裝柱
液流較慢	1.蛋白或脂類聚集	及時(shí)清洗介質(zhì)或?yàn)V膜
	2.蛋白沉淀在介質(zhì)中	調(diào)整平衡液和洗脫液組分，以維持目標(biāo)物的穩(wěn)定性和介質(zhì)的結(jié)合效率
	3.分離柱中微生物生長(zhǎng)	所用試劑必須經(jīng)過過濾和脫氣；樣品上柱前必須離心或過濾

8.訂購信息

表3：訂購信息表

產(chǎn)品	規(guī)格	貨號(hào)
Focurose 6B	25ml	HN060305025M
Focurose 6B	100ml	HN060305100M
Focurose 6B	500ml	HN060305500M
Focurose 6B	1L	HN060305001L
Focurose 6B	5L	HN060305005L
Focurose 6B	20L	HN060305020L