无码人妻A片一区二区青苹果,少妇搡BBBB搡BBB搡爱恋,EEUSS鲁片一区二区三区四虎,操逼视频免费观看,成人午夜视频在线观看

產(chǎn)品展示

Ni Focurose FF(IDA)

價(jià) 格:詢價(jià)

規(guī) 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產(chǎn) 地:中國(guó)

貨 號(hào):HQ060311001L

品 牌:匯研生物


在線咨詢
  • 產(chǎn)品介紹
  • 說(shuō)明書下載
  • 試用裝申請(qǐng)
  • 質(zhì)檢報(bào)告(COA)

產(chǎn)品概述

   為確保產(chǎn)品的性能和無(wú)憂的操作,使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本手冊(cè),有任何疑問(wèn)請(qǐng)咨詢本公司售后技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐匿N售人員(聯(lián)系方式見(jiàn)附錄)。

 

1.產(chǎn)品介紹

Ni Focurose FF(IDA)是利用Ni2+與蛋白質(zhì)側(cè)鏈上的某些氨基酸(主要為組氨酸、半胱氨酸、色氨酸)相互作用而進(jìn)行分離純化,適用于His標(biāo)簽蛋白及與Ni2+具有相互作用的生物分子的分離純化。

特點(diǎn):

a.快速、簡(jiǎn)單(一步純化)。

b.使用范圍廣、操作簡(jiǎn)單,適合重力柱和預(yù)裝柱(蠕動(dòng)泵或者層析系統(tǒng))。

c.多重選擇,當(dāng)Ni2+不能獲得較好的應(yīng)用時(shí),可以螯合其它的金屬離子進(jìn)行使用(例如Cu2+、Zn2+、Fe2+、Co2+、Ca2+等)。

備注:當(dāng)螯合Ca2+時(shí),避免使用磷酸鹽緩沖液(會(huì)形成沉淀)。

 

表1:Ni Focurose FF(IDA)性能參數(shù)

基質(zhì)

高度交聯(lián)6%的瓊脂糖

粒徑范圍

45-165μm

平均粒徑

90±5μm

結(jié)合載量

≥30mg(His標(biāo)簽蛋白)/ml(介質(zhì))

pH穩(wěn)定性*        

3-12(長(zhǎng)期) 2-14(短期)

化學(xué)穩(wěn)定性**

所有常用水溶液和緩沖液

避免使用螯合劑(例如EDTA、EGTA)和還原劑(例如DTT和DTE)

流速

≧300cm/h

操作壓力

≤0.3MPa

貯存溶液

20%乙醇

貯存溫度

4-30℃

*:此處穩(wěn)定性指的是在未螯合金屬離子時(shí)介質(zhì)的穩(wěn)定性。

**:Ni Focurose FF(IDA)在使用過(guò)程中,避免使用螯合劑和還原劑。

 

2.溶液制備

平衡液:0.02M PB、0.5M NaCl、0.02-0.04M Imidazole,pH 7.4。

洗脫液:0.02M PB、0.5M NaCl、0.5M Imidazole,pH 7.4。

備注:當(dāng)純化包涵體時(shí),溶液中要添加8M Urea或6M Gua-HCl


3.樣品制備

3.1樣品所在溶液要和平衡液保持一致,可以用平衡液進(jìn)行裂解、透析/超濾/G25進(jìn)行緩沖液置換。

3.2樣品過(guò)濾(平均粒徑<45μm,用0.22μm過(guò)濾;45μm<平均粒徑<165μm,用0.45μm過(guò)濾;平均粒徑>165μm,用   0.8μm過(guò)濾)。

 

4.純化流程(以XK16/10為例)

采用液滴對(duì)液滴(避免引入氣泡)的方式將柱子連接到層析系統(tǒng)上。

用純化水以5ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

4.3 用洗脫液以5ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

4.4 用平衡液以5ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。

4.5 將樣品以5ml/min的流速上樣。

4.6 用平衡液以5ml/min的流速?zèng)_洗至紫外吸收值平穩(wěn)(10-15個(gè)CV)。

4.7 用洗脫液以5ml/min的流速洗脫5CV或20CV(階梯式洗脫5CV/線性梯度洗脫20CV)。

 

5.再生(以XK16/10為例)

5.1用純化水以5ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。

5.2用剝離液以5ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。

5.1 用平衡液以5ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。

5.2 用純化水以5ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。

5.3 用0.1M NiSO4以5ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

5.4 用純化水以5ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

5.5 用平衡液以5ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

5.6 用20%乙醇以5ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

備注:剝離液,0.02M PB、0.5M NaCl、0.05 EDTA,pH 7.4。

 

6.清洗(以XK16/10為例)

6.1 參照5.1-5.4操作將Ni2+剝離。

6.2 用1.5M NaCl以5ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。

6.3 用純化水以5ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。

6.4 用1.0M NaOH以2.5ml/min的流速?zèng)_洗30個(gè)CV。

6.5 用平衡液以5ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。

6.6 用純化水以5ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。

6.7 用30%異丙醇以2.5ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。

6.8 參照5.4-5.8操作將Ni2+螯合。

 

7.常見(jiàn)問(wèn)題

表2:常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案

問(wèn)題

可能原因

解決方案

純化時(shí)目標(biāo)物不與介質(zhì)結(jié)合

或結(jié)合量較低

1.上樣量過(guò)載

降低上樣量

2.上樣流速過(guò)快

降低上樣流速

3.蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集影響結(jié)合

及時(shí)有效地清洗介質(zhì)或更換新的介質(zhì)

4.表達(dá)條件過(guò)于劇烈,His標(biāo)簽被包裹,不能與介質(zhì)結(jié)合

建議做一個(gè)空載體作為表達(dá)和純化的對(duì)照,確定表達(dá)條件是否合適

5.初始樣品中沒(méi)有組氨酸標(biāo)簽蛋白

通過(guò)基因序列或His標(biāo)簽抗體核實(shí)

6.目標(biāo)蛋白出現(xiàn)在流穿中

目標(biāo)蛋白沒(méi)有成功表達(dá)或樣品與平衡液中pH及組分不正確

洗脫時(shí)沒(méi)有收集到目標(biāo)物

或只收集到少量目標(biāo)物

1.目標(biāo)物沒(méi)有與介質(zhì)結(jié)合或結(jié)合量較少

先確認(rèn)目標(biāo)物是否與介質(zhì)結(jié)合

2.洗脫條件不合適

加大洗脫液中咪唑濃度

3.洗脫時(shí)間不夠

降低流速,延長(zhǎng)洗脫液的保留時(shí)間

4.洗脫體積過(guò)小

加大洗脫體積

5.洗雜時(shí),目的蛋白被洗下來(lái)

降低洗雜液中的咪唑濃度

6.目標(biāo)物在洗脫液條件下出現(xiàn)聚集沉淀

檢測(cè)目標(biāo)物在洗脫液條件(pH和鹽濃度)下的溶解度和穩(wěn)定性。可以嘗試在洗脫液中加入一些添加劑:如0.2% Triton X-100或0.5% Tween 20

目標(biāo)物純度較低

 

1.樣品沒(méi)有經(jīng)過(guò)前處理

樣品上柱前必須要經(jīng)過(guò)離心或過(guò)濾

2.樣品粘度過(guò)高

用平衡液適當(dāng)?shù)南♂寴悠?,降低粘度?/span>

3.洗雜不徹底

加大洗雜體積直至基線平穩(wěn)并與平衡液一致

4.雜質(zhì)蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集沉淀

及時(shí)有效地清洗介質(zhì)

5.雜質(zhì)與Ni2+具有較高的親和力。

用其它類型介質(zhì)進(jìn)行純化(如離子或分子篩)

6.目標(biāo)物出現(xiàn)降解

檢測(cè)目標(biāo)物的穩(wěn)定性并加入蛋白酶抑制劑

7.柱料裝填效果不佳

重新裝填或購(gòu)買

8.雜質(zhì)與介質(zhì)出現(xiàn)非特異性吸附

適當(dāng)選擇添加劑降低非特異性吸附,可以嘗試在樣品中加入一些添加劑:如0.5%Triton X-100、1.0% Tween 20或50%甘油

9.分離柱頂部有較大儲(chǔ)樣體積

重新裝柱或降低儲(chǔ)樣體積

10.介質(zhì)中有微生物生長(zhǎng)

介質(zhì)使用完后,請(qǐng)及時(shí)正確保存介質(zhì)

介質(zhì)載量下降

1.上樣流速過(guò)快

降低上樣流速

2.蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集,導(dǎo)致載量下降。

及時(shí)清洗介質(zhì)

3.使用次數(shù)過(guò)多

更換新介質(zhì)

4.表達(dá)條件過(guò)于劇烈,His標(biāo)簽被包裹,不能較好與介質(zhì)結(jié)合

建議做一個(gè)空載體作為表達(dá)和純化的對(duì)照,確定表達(dá)條件是否合適

色譜峰上升過(guò)陡

介質(zhì)裝填過(guò)緊

重新裝柱

色譜峰上升過(guò)緩或拖尾

介質(zhì)裝填太松

重新裝柱

柱床有裂縫或干涸

出現(xiàn)泄露或大體積氣泡引入

檢查管路是否有泄露或氣泡,重新裝柱

液流較慢

1.蛋白或脂類聚集

及時(shí)清洗介質(zhì)或?yàn)V膜

2.蛋白沉淀在介質(zhì)中

調(diào)整平衡液和洗脫液組分,以維持目標(biāo)物的穩(wěn)定性和介質(zhì)的結(jié)合效率

3.分離柱中微生物生長(zhǎng)

所用試劑必須經(jīng)過(guò)過(guò)濾和脫氣;

樣品上柱前必須離心或過(guò)濾

 

8.訂購(gòu)信息

表3:訂購(gòu)信息表

產(chǎn)品

規(guī)格

貨號(hào)

Ni Focurose FF(IDA)

25ml

HQ060311025M

Ni Focurose FF(IDA)

100ml

HQ060311100M

Ni Focurose FF(IDA)

500ml

HQ060311500M

Ni Focurose FF(IDA)

1L

HQ060311001L

Ni Focurose FF(IDA)

5L

HQ060311005L

Ni Focurose FF(IDA)

20L

HQ060311020L

備注:大規(guī)格包裝產(chǎn)品或其它產(chǎn)品購(gòu)買,請(qǐng)咨詢本公司當(dāng)?shù)劁N售或售前技術(shù)支持。


查看更多詳情

Ni Focurose FF(IDA)

Ni Focurose FF(IDA)

 尊敬的客戶,感謝您關(guān)注匯研生物!如您需申請(qǐng)?jiān)囉?,?qǐng)?zhí)顚懸韵卤韱?,我們收到您的試用申?qǐng)表單后,會(huì)盡快與您取得聯(lián)系,或者您也可以直接撥打熱線:027-87772229進(jìn)行試用申請(qǐng)!

Ni Focurose FF(IDA)

地址:武漢市東湖開(kāi)發(fā)區(qū)高新二路388號(hào)光谷國(guó)際生物醫(yī)藥企業(yè)加速器C11棟20層

電話:027-87772229

郵箱:huiyanbio@126.com

微信公眾號(hào)

匯研手機(jī)站

在線咨詢
電話咨詢
在線留言
微信客服

返回頂部
爽 躁多水 快 深点无码 | 国产精品无码日韩18 | AAA一级黄色视频 | 中文字字幕在线中文乱码 | 麻豆人妻偷人精品无码视频 | 蜜桃狠狠色伊人亚洲综合网 | 日本黑人乱偷人妻中文 | 韩国特级婬片A片免费看少妇 | 四川一级毛片免费看 | 国产91精品看黄网站在线观看 | A片视频免费在线播放 | 国产 在线观看免费视频 | 特级丰满小妇免费观看 | 小辣椒成人aV一区二区 | 国产农村无套内射无套 | 精品裸体BBB书BBBBBB | 欧美交受 高潮1 | 国产AV一区二区三区传媒 | 国产传媒免费在线观看 | 91精品一区二区三区蜜桃 | 西西4444www无码| 少妇真人直播免费视频 | 污污的视频网站免费看 | 人妻久久久精品996系列A片 | 少妇ccc.www 无码 | 国产做爰又粗又大太疼了 | 黄污视频网站在线观看污污污网 | 中文字幕无码电影 | 亚洲+免费+成人+精品 | 精品秘 无码一区二区三 | 波多野结衣结衣无码视频在线播放 | 国产一a毛一a毛A免费看图 | 成人网站入口免费观看 | 亚洲乱码专区在线观看 | 国产精品一区二区人妻喷水 | 蜜桃视频一区二区三区四区软件介绍 | 亚洲精品无码毛片久道具明星 | 国产黄色视频网站在线观看视频网站 | 天天鲁一鲁摸一摸爽一爽 | 影音先锋男人资源av啪啪 | 好想要做爰XXXⅩa高潮 |