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產(chǎn)品展示

Heparin Focurose HF

價 格:詢價

規(guī) 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產(chǎn) 地:中國

貨 號:HQ190321001L

品 牌:匯研生物


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產(chǎn)品概述

   為確保產(chǎn)品的性能和無憂的操作,使用前請仔細閱讀本手冊,有任何疑問請咨詢本公司售后技術(shù)支持或當?shù)氐匿N售人員(聯(lián)系方式見附錄)。

 

1.產(chǎn)品介紹

Heparin Focurose HF適用于各種酶類的分離純化,包括抗凝血酶Ⅲ、類凝血酶、人凝血因子Ⅸ/Ⅺ/Ⅷ、脂蛋白脂肪酶、膠原酶、DNA聚合酶等;也有和人白介素、人前列腺生長因子、重組人血管內(nèi)皮生長因子、軟骨生長因子、堿性成纖維細胞生長因子、重組人酸性成纖維細胞生長因子、重組肝細胞生長因子、重組鼠肝素輔因子Ⅱ、重組人血小板第四因子、重組人內(nèi)皮抑素、重組人角質(zhì)細胞生長因子等生物大分子。

特點

a.快速、簡單(一步純化)。

b.流動性好。

c.易于放大。

 

表1:性能參數(shù)

基質(zhì)

高剛性瓊脂糖

粒徑范圍

45-165μm

平均粒徑

90±5μm

配基

肝素鈉

配基密度

≧1.4mg/ml(介質(zhì))

pH穩(wěn)定性

4-13(短期) 4-12(長期)

化學穩(wěn)定性

所有常用緩沖溶液、0.1M NaOH、0.05M乙酸鈉(pH 4.0)、8M尿素、6M鹽酸胍

流速

≥700cm/h

操作壓力

≤0.5MPa

貯存溶液

0.05M NaAc,20%乙醇

貯存溫度

4-30℃

 

2.溶液配制

平衡液:0.01M PB,pH ~7.0。

洗脫液:0.01M PB、2.0 M NaCl,pH ~7.0

 

3.樣品制備

3.1樣品所在溶液要和平衡液保持一致,可以用平衡液進行裂解、透析/超濾/G25進行緩沖液置換。

3.2樣品過濾(平均粒徑<45μm,用0.22μm過濾;45μm<平均粒徑<165μm,用0.45μm過濾;平均粒徑>165μm,用   0.8μm過濾)。

4.純化流程(以XK16/10為例)

4.1采用液滴對液滴(避免引入氣泡)的方式將柱子連接到層析系統(tǒng)上。

4.2用純化水以5ml/min沖洗10CV。

4.3用平衡液以5ml/min沖洗10CV。

4.4將樣品以1.0ml/min上樣,上樣完成后用平衡液進行清洗直至基線平穩(wěn)。

4.5用洗脫液以5ml/min洗脫10CV,并收集洗脫液。

4.6用純化水以5ml/min沖洗5CV。

4.7用保存液以5ml/min沖洗后保存

 

5.放大

保持柱床高度不變

5.2 保持線性流速不變

備注:若實際情況和實驗室數(shù)據(jù)有偏差,可以維持停留時間不變。

 

6.清洗

清洗后可以去除一些強結(jié)合性物質(zhì)(例如一些強結(jié)合的蛋白、變性物質(zhì)、沉淀等),從而達到恢復介質(zhì)的優(yōu)良性能(例如載量、流動性、柱效等)。

建議每使用5次后進行一次清洗,具體清洗頻率需根據(jù)純化的初始樣品的潔凈度進行調(diào)整。

a.用2.0 M NaCl沖洗5CV,用純化水沖洗10CV。

b.用1.0% Triton X-100沖洗5CV,用純化水沖洗10CV。

c.用0.1M NaOH或6M鹽酸胍沖洗5CV,用純化水沖洗10CV。

d.用20%乙醇沖洗5CV后保存。

 

7.常見問題

表2:常見問題及解決方案

問題

可能原因

解決方案

純化時目標物不與介質(zhì)結(jié)合

或結(jié)合量較低

1.上樣量過載

降低上樣量

2.上樣流速過快

降低上樣流速

3.蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集

及時有效地清洗介質(zhì)或更換新的介質(zhì)

4.樣本或平衡液中pH不在正確的范圍

保證樣本和平衡液pH一致

洗脫時沒有收集到目標物

或只收集到少量目標物

1.目標物沒有與介質(zhì)結(jié)合或結(jié)合量較少

先確認目標物是否與介質(zhì)結(jié)合

2.洗脫條件不合適

更換洗脫液

3.洗脫時間不夠

降低流速,延長洗脫液的保留時間

4.洗脫體積過小

加大洗脫體積

5.目標物在洗脫液條件下出現(xiàn)聚集沉淀

檢測目標物在洗脫液條件(pH)下的溶解度和穩(wěn)定性。

目標物純度較低

 

1.樣品沒有經(jīng)過前處理

樣品上柱前必須要經(jīng)過離心或過濾

2.樣品粘度過高

用平衡液適當?shù)南♂寴悠?,降低粘度?/span>

3.洗雜不徹底

加大洗雜體積直至基線平穩(wěn)并與平衡液一致

4.雜質(zhì)蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集沉淀

及時有效地清洗介質(zhì)

5.洗脫條件不佳,洗脫流速太快、梯度太陡。

優(yōu)化洗脫條件

6.目標物出現(xiàn)降解

檢測目標物的穩(wěn)定性

7.柱料裝填效果不佳

重新裝填或購買

8.雜質(zhì)出現(xiàn)非特異性吸附

適當選擇添加劑降低非特異性吸附

9.分離柱頂部有較大儲樣體積

重新裝柱或降低儲樣體積

10.介質(zhì)中有微生物生長

介質(zhì)使用完后,請及時正確保存介質(zhì)

介質(zhì)載量下降

1.上樣流速過快

降低上樣流速

2.蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集,導致載量下降。

及時清洗介質(zhì)

3.使用次數(shù)過多,配基被氧化或脫落

及時清洗介質(zhì)或更換新介質(zhì)

色譜峰上升過陡

介質(zhì)裝填過緊

重新裝柱

色譜峰上升過緩或拖尾

介質(zhì)裝填太松

重新裝柱

柱床有裂縫或干涸

出現(xiàn)泄露或大體積氣泡引入

檢查管路是否有泄露或氣泡,重新裝柱

液流較慢

1.蛋白或脂類聚集

及時清洗介質(zhì)或濾膜

2.蛋白沉淀在介質(zhì)中

調(diào)整平衡液和洗脫液組分,以維持目標物的穩(wěn)定性和介質(zhì)的結(jié)合效率

3.分離柱中微生物生長

所用試劑必須經(jīng)過過濾和脫氣;

樣品上柱前必須離心或過濾

 

 

8.訂購信息

表3:訂購信息表

產(chǎn)品

規(guī)格

貨號

Heparin Focurose HF

25ml

 HQ190321025M

Heparin Focurose HF

100ml

 HQ190321100M

Heparin Focurose HF

500ml

 HQ190321500M

Heparin Focurose HF

1L

 HQ190321001L

Heparin Focurose HF

5L

 HQ190321005L

Heparin Focurose HF

20L

 HQ190321020L

備注:大規(guī)格包裝產(chǎn)品或其它產(chǎn)品購買,請咨詢本公司當?shù)劁N售或售前技術(shù)支持。


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Heparin Focurose HF

Heparin Focurose HF

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Heparin Focurose HF

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